ويعتمد ثبات الحمض النووي الريبوزي على درجة الحرارة بدرجة كبيرة، حيث تتفاوت معدلات التدهور بشكل كبير عبر ظروف التخزين.وفي حين يبقى الحمض النووي الريبي مستقرًا لفترات طويلة في درجات حرارة منخفضة للغاية (-20 درجة مئوية إلى -80 درجة مئوية)، تتدهور سلامته تدريجيًا في درجات حرارة أعلى، خاصةً فوق 4 درجات مئوية.التخزين قصير الأجل في درجة حرارة الغرفة ممكن، ولكنه ينطوي على مخاطر تدهور أعلى مقارنةً بالظروف المبردة أو المجمدة.
شرح النقاط الرئيسية:
-
التخزين في درجات حرارة منخفضة للغاية (-20 درجة مئوية إلى -80 درجة مئوية)
- يبقى الحمض النووي الريبي مستقراً لأشهر إلى سنوات عند تخزينه في درجة حرارة -20 درجة مئوية أو -80 درجة مئوية.
- لا تؤدي دورات التجميد والذوبان المتكررة (حتى 10 مرات) إلى تدهور الحمض النووي الريبي بشكل كبير، مما يجعل درجات الحرارة هذه مثالية للحفظ على المدى الطويل.
- ومع ذلك، يجب تجنب المجمدات الخالية من الصقيع بسبب التقلبات في درجات الحرارة التي قد تؤثر على الاستقرار.
-
التخزين المبرد (4 درجات مئوية)
- يمكن تخزين الحمض النووي الريبي في درجة حرارة 4 درجات مئوية لمدة تصل إلى 14 يوماً دون تدهور كبير.
- قد يحدث تبخر للمخازن المؤقتة للتخزين بمرور الوقت، لذلك يوصى بإغلاق الأنابيب بإحكام.
- مناسبة للتجارب قصيرة الأجل ولكنها ليست مثالية للتخزين لفترات طويلة.
-
درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية)
- يظل الحمض النووي الريبي مستقرًا لمدة 48 ساعة تقريبًا في درجة حرارة الغرفة، لكن مخاطر التحلل تزداد بعد هذه المدة.
- يمكن أن يؤدي التلوث بال RNase أو التعرض للأشعة فوق البنفسجية إلى تسريع عملية التحلل، لذا فإن احتياطات المناولة أمر بالغ الأهمية.
- يُفضل استخدامه للمعالجة الفورية بدلاً من التخزين.
-
العوامل الحرجة التي تؤثر على استقرار الحمض النووي الريبي
- تلوث الحمض النووي الريبي:يمكن حتى للكميات الضئيلة من RNases أن تحلل الحمض النووي الريبي بسرعة، لذا فإن استخدام أنابيب وكواشف خالية من RNase أمر ضروري.
- تركيبة المخزن المؤقت:التخزين في المخازن المؤقتة المثبطة للإنزيمات المثبطة للإنزيمات (مثل المخزن المؤقت TE أو محاليل تثبيت الحمض النووي الريبي التجارية) يعزز الثبات.
- تركيز العينة:يتحلل الحمض النووي الريبي المخفف بشكل أسرع؛ أما العينات المركزة فهي أكثر مرونة.
-
توصيات عملية للمشترين
- تحديد الأولويات المواد الاستهلاكية الخالية من RNase (الأنابيب والأطراف) لتقليل مخاطر التلوث.
- للمختبرات التي لا تحتوي على مجمدات منخفضة للغاية, كواشف تثبيت الحمض النووي الريبي (على سبيل المثال، الحمض النووي الريبوزي لاحقًا) يمكن أن تزيد من ثباته في درجة حرارة الغرفة.
- النظر في الحمض النووي الريبي المجفف بالتجميد للتطبيقات التي تتطلب التخزين في البيئة المحيطة، حيث أنه يقاوم التدهور بشكل أفضل من العينات السائلة.
من خلال فهم ملامح الثبات المعتمدة على درجة الحرارة هذه، يمكن للباحثين والمشترين اتخاذ قرارات مستنيرة بشأن معالجة الحمض النووي الريبي ومعدات التخزين والمواد الاستهلاكية لضمان سلامة العينة.
جدول ملخص:
| درجة حرارة التخزين | مدة الاستقرار | الاعتبارات الرئيسية |
|---|---|---|
| -20 درجة مئوية إلى -80 درجة مئوية | من أشهر إلى سنوات | تجنب المجمدات الخالية من الصقيع؛ مستقرة حتى بعد دورات التجميد والذوبان المتعددة. |
| 4 درجات مئوية (مبردة) | حتى 14 يومًا | أغلق الأنابيب بإحكام لمنع تبخر المخزن المؤقت. |
| درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) | ~حوالي 48 ساعة | مخاطر تدهور عالية؛ استخدم معالجة خالية من RNase. |
تأكد من بقاء عينات الحمض النووي الريبي سليمة باستخدام حلول التخزين المناسبة. KINTEK توفر معدات مختبرية ومواد استهلاكية عالية الجودة مصممة خصيصًا لسير عمل البيولوجيا الجزيئية. اتصل بنا اليوم لمناقشة احتياجات تخزين الحمض النووي الريبي الخاص بك واستكشاف مجموعتنا من منتجاتنا الخالية من RNase!
