إذا لم يكن التعقيم بالأوتوكلاف مناسبًا لتعقيم وسائط الاستزراع، فإن الطريقة البديلة هيالتعقيم بالترشيح. تتضمن هذه الطريقة تمرير وسائط المزرعة عبر مرشح ذي مسام صغيرة بما يكفي لحبس الكائنات الحية الدقيقة، مما يؤدي إلى إزالتها بشكل فعال من الوسائط دون تعريض الوسائط للحرارة.
ملخص التعقيم بالترشيح:
التعقيم بالترشيح هي عملية يتم فيها تعقيم وسائط الزرع عن طريق تمريرها عبر مرشح ذي مسام صغيرة جدًا، عادةً ما تكون 0.22 ميكرون، قادرة على حبس البكتيريا والفيروسات والكائنات الدقيقة الأخرى. تُعد هذه الطريقة مفيدة بشكل خاص للوسائط الحساسة للحرارة حيث يمكن أن تتحلل المكونات بالحرارة.
-
الشرح التفصيلي:
- مبدأ الترشيح:
-
يعتمد التعقيم بالترشيح على الحاجز المادي الذي توفره المرشحات ذات أحجام المسام الصغيرة بما يكفي لمنع مرور الكائنات الحية الدقيقة. حجم المسام القياسي لمعظم المرشحات البيولوجية هو 0.22 ميكرون، وهو فعال في حبس البكتيريا ومعظم الفيروسات.
- المعدات المستخدمة:
-
تشمل المعدات الأساسية المستخدمة في التعقيم بالترشيح مرشحات المحاقن أو أنظمة الترشيح بالتفريغ أو وحدات الترشيح بالضغط. هذه الأنظمة مصممة للتعامل مع أحجام مختلفة من الوسائط ويمكن تكييفها لتلبية الاحتياجات المختبرية المختلفة.
- الإجراء:
-
يتم تحضير وسائط المزرعة كالمعتاد، ولكن بدلاً من تعقيمها، يتم تمريرها من خلال المرشح. يمكن القيام بذلك عن طريق سكب الوسائط في محقنة مزودة بمرشح ثم طرد الوسائط من خلال المرشح إلى حاوية معقمة. بالنسبة للأحجام الأكبر، يتم استخدام إعداد الترشيح بالتفريغ أو الترشيح بالضغط.
- المزايا:
-
تتمثل الميزة الرئيسية للتعقيم بالترشيح في أنه لا ينطوي على حرارة، مما يجعله مثاليًا للوسائط التي تحتوي على مكونات قابلة للحرارة. كما تسمح هذه الطريقة أيضًا بتعقيم الوسائط التي قد تتغير بالحرارة، مثل تلك التي تحتوي على إنزيمات أو فيتامينات أو غيرها من الإضافات الحساسة للحرارة.
- الاعتبارات:
في حين أن الترشيح فعال، إلا أنه يتطلب معالجة دقيقة لضمان عدم انسداد المرشح وأن تتم العملية في ظروف معقمة لمنع إعادة التلوث. بالإضافة إلى ذلك، يمكن أن تكون تكلفة المرشحات والمعدات اللازمة للترشيح أعلى من التكلفة المرتبطة بالتعقيم.الخلاصة:
يعد التعقيم بالترشيح بديلاً عمليًا للتعقيم بالأوتوكلاف لوسائط الاستزراع، خاصةً عند التعامل مع المكونات الحساسة للحرارة. فهو يوفر طريقة لتحقيق التعقيم دون المساس بسلامة الوسائط، مما يجعلها تقنية أساسية في علم الأحياء المجهرية ومختبرات علوم الحياة الأخرى.
